EB病毒感染实验室诊断及临床应用 | 专家共识
本文经《中华医学杂志》社有限责任公司授权，仅限于非商业应用。 全国儿童EB病毒感染协作组 中华实验和临床病毒学杂志编辑委员会 导读EB病毒(EBV)为疱疹病毒科，疱疹病毒Ⅳ型，是一种嗜人类淋巴细胞的疱疹病毒。淋巴细胞中潜伏感染的EBV可表达2种不翻译成蛋白质的RNA(即EBV-encoded RNAs，EBERs)，包括EBER1 和EBER2，6种核抗原( EBNA1、EBNA2、EBNA3A、EBNA3B、EBNA3C 和LP)，2种潜伏期膜蛋白(潜伏膜蛋白，latent membrane protein，LMP)，包括LMP1、LMP2A/B。 EBV在人群中感染非常普遍，约90%以上的成人血清EBV抗体阳性。除原发性EBV感染可致传染性单核细胞增多症(infectious monont-ucleosis，IM)外，EBV 还引起慢性活动性EBV感染(chronic active EBV infection，CAEBV)和EBV相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(EBV-HLH)等非肿瘤性重症EBV 相关疾病。EBV还是一种致肿瘤病毒，与许多肿瘤的发生相关，如霍奇金淋巴瘤(HL)、非霍奇金淋巴瘤(NHL)，鼻咽癌(NPC)，胃癌和移植后淋巴细胞增殖症(PTLD)等。 EBV原发感染后建立终身潜伏感染。EBV潜伏感染可分为四种类型: ? EBV潜伏感染0型，在健康的EBV既往感染个体，EBV在记忆性B 细胞潜伏，只表达EBERs，这些个体称为健康携带者。 在EBV感染相关疾病中，EBV有三种潜伏感染类型。 ? 潜伏感染Ⅰ型， 除EBERs外，EBV只表达EBNA1和BamHI A右侧片段(BARTs)，如Burkitt’s淋巴瘤; ? 潜伏感染Ⅱ型，EBV表达EBNA1、LMP1、LMP2、BART'S和EBERs，如鼻咽癌、霍奇金淋巴瘤; ? 潜伏感染Ⅲ型，EBV 表达所有的潜伏感染基因，如免疫抑制病人的淋巴组织增生性疾病(表1)。 针对不同的EBV 感染相关疾病，选择适当的临床标本和实验室检测方法，对于EBV 感染相关疾病的诊断和治疗十分重要。为提高国内EBV 感染相关疾病的诊治水平，特组织病毒学、临床和实验室诊断等方面的专家，参考国内外最新研究成果，制定此专家共识，以规范EBV 实验室诊断方法的临床应用。 一、EBV感染实验室诊断方法1. EBV特异性抗体检测 (1)特异性抗体谱: EBV编码多种结构抗原，包括病毒衣壳抗原(VCA)、早期抗原(EA)、膜抗原(MA)、核抗原(NA)等。机体感染EBV后针对不同的抗原产生相应的抗体(图1)。原发性EBV感染过程中首先产生针对VCA的IgM和IgG(抗VCA-IgM/IgG);在急性感染的后期，抗EA-IgG出现;在恢复期晚期，抗EBV核抗原(EBNA)IgG产生。目前主要用于实验室检测的EBV 特异性抗体包括抗VCA-IgG、抗VCA-IgM 和抗EBNA-IgG。另外，抗VCA-IgA 和抗EA-IgA 阳性提示持续性EBV 抗原刺激，常用于CAEBV 或EBV 相关肿瘤的诊断和监测。 VCA:病毒衣壳抗原;EBNA:EBV 核抗原;EA:早期抗原 图1 EBV 原发感染和既往感染后抗体滴度变化 (2)抗体亲和力:机体在初次接触病原体时产生的特异性IgG 抗体对相应抗原的亲和力随着免疫反应的进行会逐渐升高，抗VCA-IgG 抗体亲和力的检测可帮助鉴别EBV 原发感染和既往感染，其检测方法包括免疫荧光或酶联免疫方法。 (3)检测方法及标本类型:EBV特异性抗体检测的适宜标本为血清或血浆，检测方法主要包括免疫荧光法、免疫酶法、酶联免疫法、化学发光法、免疫印迹法等，其中酶联免疫法和化学发光法由于可以实现自动化检测，在临床应用较为广泛。 (4)临床意义:对于免疫功能正常的患者，一般情况下结合抗VCA-IgM、抗VCA-IgG 和抗EBNA-IgG 3 个抗体的检测结果可以区分EBV 原发感染和既往感染:抗VCA-IgG、抗VCA-IgM 抗体阳性而抗EBNA-IgG 阴性提示EBV 原发感染，抗VCA-IgM 阴性而抗VCA-IgG 和抗EBNA-IgG 阳性则是典型的EBV 既往感染抗体类型(详见表2)。但有的病例抗VCA-IgM 产生延迟，有的则缺失或长时间存在，并且EBV 再激活时也可能出现抗VCA-IgM，抗VCA-IgM 有时也会出现假阳性(如人巨细胞病毒感染时)，4岁以下儿童抗VCA-IgM 水平低且持续时间短;抗EA-IgG 在原发感染后期出现，少数病例可能在原发感染后长时间检出，并且EBV 再激活时也可能出现抗EA-IgG;约5%的健康携带者缺失抗EBNA-IgG 抗体，另外免疫抑制患者抗EBNA-IgG 抗体也可能会丢失或水平很低;有的既往感染过EBV的患者抗VCA-IgG 可能为阴性;鼻咽癌患者VCA-IgA 和EA-IgA 抗体滴度明显高于健康携带者。因此EBV感染后血清学反应复杂多样，有时给抗体结果解释尤其是单份血清的抗体结果解释带来困难。 根据EBV 感染过程中抗体产生的不同动力学特点，同时检测患者血清中几种EBV 抗体(抗VCA-IgM/IgG、抗EA-IgG 及抗EBNA-IgG)和抗VCA-IgG亲和力可以提高诊断原发性EBV感染的敏感性和特异性，帮助判断原发性EBV 感染、既往EBV感染或既往EBV感染再激活。 上一篇：“环保卫士”诞生记--安捷伦环科院联合实验室揭 Copyright © 2018 《分析试验室》杂志社 版权所有
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